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熒光顯微鏡是免疫熒光細胞化學的基本工具

點擊次數:2052  更新時間:2021-06-26
  熒光顯微鏡是免疫熒光細胞化學的基本工具。是由光源、濾板系統和光學系統等主要部件組成。熒光顯微鏡利用一定波長的光激發標本發射熒光,通過物鏡和目鏡系統放大以觀察標本的熒光圖像。細胞中有些物質,如葉綠素等,受紫外線照射后可發熒光;另有一些物質本身雖不能發熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經紫外線照射亦可發熒光,熒光顯微鏡就是對這類物質進行定性和定量研究的工具之一。
  熒光顯微鏡的使用方法
  1、用窗簾遮蔽光線,關閉房間內的電燈,除去熒光顯微鏡的防塵罩,確保熒光顯微鏡燈室通風良好、無遮蓋。裝上汞燈燈箱,并轉動燈箱卡圈上的撥桿,將燈箱與鏡臂連接。
  2、將汞燈燈箱的電源插頭插入熒光電源箱后的插座,再將熒光電源箱的插頭插入220V外接電源。
  3、打開熒光顯微鏡電源開關,電壓表顯示出電源電壓,如電源電壓波動不大于額定電壓值的5%,即可按下啟動開關點燃汞燈,如因天氣太冷或電壓不穩定等原因,一次啟動未點燃汞燈,可以多按幾次。待超高壓汞燈弧光達到穩定狀態并達到Zda發光效率,即可開始工作。
  4、燈泡的調中:
  ①任選一塊標本放在熒光顯微鏡載物臺上。
  ②轉動鏡臂上的聚光鏡旋鈕使聚光鏡移出光路,轉動濾色片組轉換手輪,將紫光(V)或藍光(B)或綠光(G)激發濾色片組轉入光路,并將25熒光物鏡轉入光路。
  ③調節粗微調手輪,將標本像調焦清晰。
  ④前后推動垂直照明器右邊的聚光鏡調焦推桿,使視場光欄成像清晰,轉動視場光欄撥桿將視場光欄收小,調節視場光欄調中螺釘使視場光欄居中,然后再將視場光欄開至Zda。
  ⑤轉動鏡臂上的聚光鏡旋鈕使聚光鏡移入光路,前后調節燈箱上的聚光鏡撥桿,使汞燈的弧光在視場內成像清晰。
  ⑥調整燈箱上的燈泡水平調節螺釘和垂直調節螺釘,使汞燈的弧光居中。
  ⑦調整反光鏡水平調節螺釘和垂直調節螺釘,使光源的反射像與汞燈的弧光分開。
  ⑧轉動聚光鏡旋鈕把聚光鏡移出光路,此時視場照明均勻。
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